组培培养室简 单来说就是培养材料的地方,主要的功能就是进行离体植物材料的培养,因此组培培养室的设计要求一般都是围绕植物生长的的环境因子来展开的。组培培养室的设 计要求主要包含以下几个方面,它们分别是组培培养室的大小、表面是否易于灭菌、温度的控制、湿度的控制和光照的控制等。
实验室设计原则:保证无菌操作,达到工作方便,防止污染。
实验室组成:化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室(接种室)、培养室、细胞学实验室、其他小型仪器设备。
1)化学实验室(准备室):完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。
主要设备:药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、电子天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器。
组织培养实验室的设计要求和基础设备(图1)
2)洗涤、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。
主要设备:水池、操作台、高压灭菌器、鼓风干燥箱(如烘箱)等。
3)无菌操作室(接种室):主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。
主要设备:紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针)等。
接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动。接种室要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。好安装一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
4)培养室:培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜,周围墙壁要求有绝热防火的性能。
培养材料放在培养架上培养。培养架大多由金属制成,一般设5层,低一层离地高约lOcm,其他每层间隔30cm左右,培养架即高1.7m左右。培养架长度都是根据日光灯的长度而设计,如采用40W日光灯,则长I.3m,30W的长lm,宽度一般为60cm。
培养室重要的因子是温度,一般保持在20—27℃左右,具备产热装置,并安装窗式或立式空调机。由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度,好不同种类有不同的培养室。
室内湿度也要求恒定,相对湿度以保持在70%~80%为好,可安装加湿器。控制光照时间可安装定时开关钟,一般需要每天光照10-16h,也有的需要连续照明。短日照植物需要短日照条件,长日照植物需要长日照条件。现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源,这样不但可以节省能源,而且组培苗接受太阳光生长良好,驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充。
主要设备:培养架(控温控光控湿)、恒温培养摇床、培养箱、紫外光源等。
5)细胞学实验室:用于对培养物的观察分析与培养物的计数等。主要设备:双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等。
6)其他小型仪器设备:分注器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心机等。