一、什么是植物组织培养
(1)植物组织培养概念(广义)又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在人工控制条件下获得再生的完整植株或生产具有经济价值的技术。
植物组织培养概念(狭义)指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
二、植物组织技术分类
按外植体分,植物组织培养可分以下几类:
1、胚胎培养植物的胚胎培养,包括胚培养、胚乳培养、胚珠和子房培养,以及离体受精的胚胎培养技术等。
2、器官和组织培养器官培养是指植物某一器官的全部或部分或器官原基的培养,包括茎段、茎尖、块茎、球茎、叶片、花序、花瓣、子房、花药、花托、果实、种子等。组织培养有广义和狭义之分。广义:包括各种类型外植体的培养。狭义:包括形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组织和各种器官组织,以及其培养产生的愈伤组织。
3、细胞培养细胞培养包括利用生物反应器进行的,旨在促进细胞生长和生物合成的大量培养系统和利用单细胞克隆技术促进细胞生长、分化直至形成完整植株的单细胞培养。
4、原生质体培养植物原生质体是被去掉细胞壁的由质膜包裹的、具有生活力的裸细胞。
三、植物组织培养实验室建设组成
1.准备室:
完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。
要求:面积在25平方m2左右,要求宽敞明亮,方便放置多个实验台和相关设备,做好通风,便于气体交换。地面材料:方便清洁,防滑处理。
2、洗涤灭菌室
完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。
要求:根据工作需求制定面积大小,一般面积在25m2 ,一侧设置专用洗涤水槽,中央实验台配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿,地面应耐湿并排水良好。
3、缓冲间
工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能进入无菌室和培养室。减少进出时带入接种室杂菌。
要求:面积5-10m2,建在准备室外或无菌操作室外,保持清洁无菌;墙顶用1-2盏紫外灯定时照射,对衣物进行灭菌。
4、无菌操作室(接种室)
植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序,是植物离体培养研究或生产中关键的一步。
要求:面积在10m2,要求封闭性好,干爽安静,清洁明亮,能较长时间保持无菌,因此不易设在容易受潮地方,地面及内墙壁采用防水和耐腐蚀材料,为了保持清洁,此室防止空气对流。
5、培养室
无论是研究性实验室还是生产性实验材料进行培养的场所
要求:20-30m2左右,控制光照和温度,并保持相对的无菌环境。为节省能源和空间,应 配置适宜的培养架
(二)植物组培实验室建设:辅助实验室
1、细胞学实验室
对培养材料进行细胞学鉴定和研究,由制片室和显微观察室组成
要求:明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰尘污染。
2、生化分析实验室
随时对培养物成分进行取样检查的科室。