黄花风铃木的组培快繁技术

　　黄花风铃木（ Tabebuia chrysantha ）为紫葳科风铃木属落叶乔木，原产墨西哥、中美洲、南美洲，现分布在世界热带地区，在我国华南地区和西南地区均有引种，引种十几年来，已被广泛应用于华南地区园林、庭院绿化，是良好的园林绿化与行道树种 。黄花风铃木会随四季变换不同的彩衣，具有春华、夏实、秋绿、冬枯的独特风韵及呈现出良好的景观效果，其花期在春季，花先叶开放，花冠风铃状，盛开时满树金黄，颇为壮观，具有佳的观赏价值 。在我国南方的广东、海南等省多用作行道树、庭院树以及园林树种。木材可用于制造家具和乐器，树皮具有重要的药用价值；黄花风铃木生长速度中等，耐热、耐旱、耐瘠、抗污染、萌芽力强、易移植，不仅可以美化环境，而且具有良好的经济效益，是值得推广和应用的良好景观树种 。

　　黄花风铃木的常规繁殖方式为播种育苗，但其种子寿命短，很容易丧失活力，需要即采即播，其种子成熟期在 4~5 月 。因此，用种子繁殖受季节性限制，难以满足市场的需求。而通过组织培养的方式进行苗木繁殖，其繁殖速度快，苗木质量好，可达到苗木规模化生产的目的。目前，国内利用组织培养技术繁殖黄花风铃木的有关研究少，公开的只有 2 项相关的发明专利，或其中 1 项（“一种黄花风铃木组织培养快速繁殖方法”CN201710170198.1）也是笔者所拥有的所有权专利 。笔者根据试验研究总结了黄花风铃木的组培快繁技术，旨在提供一种实用、有效的育苗途径，为实现黄花风铃木的快速繁殖提供理论依据。

　　1 无菌苗的获取

　　1.1 外植体的选取及处理

　　选择黄花风铃木的种子作为外植体。由于黄花风铃木的果实成熟后会自然裂开，种子易随风飘散，所以应在果实成熟而未开裂前，即由绿转变成黄褐色时，及时采收，采收后晒干果实，等果荚自然开裂后抖出种子，并阴干 。剥去外层种壳，取种仁，在超净工作台上以 0.1% HgCl 2 溶液消毒 8~10min，再用无菌水清洗4~5 次，沥干水分。

　　1.2 初始培养

　　将已消毒处理好的种子接种至初始培养基上，初始培养基为 MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+ 蔗糖30g/L+ 琼脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。接种后暗培养 5d，再移至自然光照条件下培养 20d，培养温度为 25±2℃。暗培养 5d 后种子开始萌动，在自然光照条件下继续培养 5d 即可长出小苗，20d 无菌小苗可长至约 4cm 高。

　　2 不定芽的分化及增殖培养

　　2.1 不定芽的分化

　　将初始培养获得的无菌苗剪切成长约 2cm的带腋芽节段，接种到芽分化培养基上，芽分化培养基为MS（改良）+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸25mg/L+ 蔗糖 30 g/L+ 琼脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。接种时将带腋芽节段斜插在培养基上，接种后放在培养室内弱光条件下培养，光照较弱可促进不定芽的分化。培养温度 25±2℃，光照强度 1000~1500Lx，每天光照12~14h，培养 20d 左右在腋芽处可分化出小芽。此时，将培养材料移到光照强度稍强的地方继续培养，光照强度 2000~3000Lx，在培养温度和光照时间不变的条件下，适当提高光照强度可促进已分化的小芽长高。

　　2.2 不定芽的增殖

　　待分化出的小芽长到 2cm 以上时，再将小芽切下，剪成带腋芽的小段，转接至芽增殖培养基上进行芽的增殖培养，每隔 30d 左右转接 1 次。芽增殖培养基和培养条件与芽分化培养相同，但随着增殖代数的增加，需要根据培养材料的生长情况适当调整培养基配方或培养条件，以保证继代苗正常生长，增殖系数达 3.0 以上。

　　3 生根培养及炼苗

　　3.1 生根培养

　　剪取生长健壮，长 3cm 以上的继代苗接种至生根培养基上进行生根培养，生根培养基为 1/4MS+IBA1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 琼脂粉 4.5g/L，pH 值 5.8，生根培养的无机盐浓度降低为 1/4MS 更有利于黄花风铃木诱导生根。接种后放在培养室内暗培养，在根原基诱导的第一阶段需进行一定时间的暗培养，有利于诱导生根 。培养 12d 后小苗的基部切口处开始膨大长出愈伤组织，继续培养 5d 后从愈伤组织处长出白色的根，生根率达 92%以上。然后移到弱光条件下继续培养，培养温度为 25±2℃，光照强度1000~1500Lx，每天光照 12~14h。

　　3.2 炼苗

　　生根培养 25d 后，待小苗的根系基本长齐，将生根瓶苗移至炼苗棚进行炼苗，炼苗时间为 10d。炼苗棚必须采光良好，并配备有遮阳网，随时可以调节光照强度。在刚从培养室移到炼苗棚的最初几天，常需要适当遮荫，以防强光灼伤幼苗，待小苗慢慢适应室外的环境后再加强光照，使组培生根苗木质化程度逐渐增强，更能适应移栽后的生长环境。

　　4 生根苗移栽

　　4.1 育苗基质准备

　　育苗基质好坏常常是能否移栽成活和幼苗生长的关键。黄花风铃木对土壤要求不严格，喜疏松肥沃、排水良好、富含有机质的中性至微酸性壤土 。因此，育苗基质选用泥炭︰黄心土︰河沙 =2︰1︰1（体积比），将 3 种基质混合均匀，分装到育苗营养袋，然后摆放于育苗托上，再用 0.2%高锰酸钾溶液对育苗基质进行消毒，消毒后用清水将基质淋透，置于温室育苗棚内备用。

　　4.2 生根苗移栽

　　将经过炼苗的生根苗从培养瓶中取出，用清水轻轻地洗去小苗根系上附着的培养基，注意不要损伤根系和茎叶。移栽时先用镊子在育苗营养袋的基质挖 1个小穴，然后将洗干净的生根小苗移栽至小穴内，再用手轻轻将基质压一下，然后要淋透水，用薄膜覆盖以保温保湿。

　　4.3 移栽后管理

　　4.3.1 温湿度控制。在生根苗移栽初期，光照不能过强或过弱，可以用遮阳网适度遮荫，还要经常喷雾浇水，保持环境相对湿度在 85%以上。保持温室育苗棚温度在 20~25℃，不宜过高，因为高温高湿的环境易使小苗感病死亡，一般是较低的气温有利于缓苗。缓苗后（有初生新叶出现）逐步揭开薄膜适度通风，直至完全揭开。

　　4.3.2 病害防治和水肥管理。每周喷施 1 次杀菌剂，杀菌剂一般用甲基托布津、多菌灵、代森锰锌等抗菌药，预防病害的发生，几种杀菌剂可以交替使用，避免病菌产生抗药性。移栽后 30d，随着小苗的生长，进入后期管理，此时可在阴天时将苗木移出温室育苗棚进行苗木常规管理。主要是淋足水，保持 60%~80%的相对湿度，定期施肥、喷农药。

　　5 结语

　　（1）以黄花风铃木的种子作为外植体比较方便消毒，更容易获得无菌材料。消毒前需剥去外层种壳，由于里面的种仁受外界污染少，因此消毒起来比较简单，外植体污染率低。同时，种子要随采随用，避免因储存过久影响种子的活力而降低种子的萌芽率。

　　（2）黄花风铃木不定芽的诱导和分化可以用同一种培养基，适合不定芽诱导和分化的培养基为 MS（改良）+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸 25mg/L+蔗糖 30g/L+ 琼脂粉 4.2g/L，pH 值 5.8。在增殖培养过程中培养材料容易出现褐化现象，在培养基中添加 L-半胱氨酸可以较好地控制材料在培养过程中出现的褐化现象，提高不定芽的分化率；同时，随着增殖代数的增加，要注意激素的累积对培养材料生长的影响，需要根据培养材料的生产情况随时适当调整激素的用量。

　　（3）黄花风铃木组培苗生根相对比较困难，经过多次调试，发现降低培养基中无机盐浓度和蔗糖用量对其生根更有利。一般来说，生根培养基的盐离子浓度和糖浓度均低于增殖培养基，降低无机盐浓度可提高大多数植物的生根能力。适合的生根培养基为1/4MS+IBA 1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 琼脂粉 4.5g/L，pH 值 5.8。

　　（4）生根苗在移栽前需进行炼苗，增加小苗的木质化程度，对移栽成活更有利。移栽时基质的选择也很关键，黄花风铃木喜疏松肥沃、排水良好、富含有机质的中性至微酸性壤土，生根苗移栽在温室大棚内进行，温室大棚内的温度比较高，水分蒸发量比较大，而泥炭土持水量大和保水性能好为植物生长提供一个更适合的环境，再添加适量黄泥土和河沙，可以提高基质中的有机质和增强其透气性。移栽基质选用泥炭︰黄心土︰河沙 =2︰1︰1（体积比）较好，移栽成活率较高。